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抗體的特異性斷定

抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的辨認(rèn)才干。抗體的特異性高，它的辨認(rèn)才干就強(qiáng)。衡量特異性一般以交叉反應(yīng)率來標(biāo)明。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)賽克制試驗(yàn)測(cè)定。

以不同濃度抗原和近似抗原別離做競(jìng)賽克制曲線，核算各自的結(jié)合率，求出各安閑IC50時(shí)的濃度，并按公式核算交叉反應(yīng)率。

假如所用抗原濃度IC50濃度為pg/管，而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時(shí)，標(biāo)明這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0，即該血清的特異性較好。

拓展延伸：

1. 抗體的效價(jià)斷定

不管是用于確診仍是用于醫(yī)治，制備抗體的目的都是要求較價(jià)。不同的抗原制備的抗體，要求的效價(jià)紛歧。斷定效價(jià)的辦法很多，包括有試管凝集反應(yīng)、瓊脂分散試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的斷定效價(jià)的辦法，以資比較。如制備抗抗體的效價(jià)，一般就采用瓊脂分散試驗(yàn)來斷定。

2. 抗體的親和力斷定

抗體的親和力是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的凹凸是由抗原分子的巨細(xì)、抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原抉擇簇之間立體構(gòu)型的合適度抉擇的。有助于保持抗原抗體復(fù)合物安穩(wěn)的分子間力有氫鍵、疏水鍵、側(cè)鏈相反電荷基因的庫(kù)侖力、范德華力和空間斥力。

親和力常以親和常數(shù)K標(biāo)明，K的單位是L/mol，一般K的范圍在108～1010/mol，也有多達(dá)1014/mol。抗體親和力的測(cè)定對(duì)抗體的挑選，確認(rèn)抗體的用途，驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義。